桉樹(shù)組織培養(yǎng)，桉樹(shù)：桃金娘科桉樹(shù)屬植物的總稱(chēng)，速生豐產(chǎn)的優(yōu)良造紙用材樹(shù)種，在華南地區(qū)大力推廣種植。

1. 外植體的消毒處理

晴天午后，剪取經(jīng)選優(yōu)良植株基部的萌芽條為外植體。外植體經(jīng)剪除葉片后，剪成帶1~2個(gè)腋芽的莖段，置流水中沖洗一段時(shí)間，經(jīng)無(wú)菌水清洗3遍后在無(wú)菌條件下進(jìn)行以下操作：(1)用75%酒精消毒30-60 s，用無(wú)菌水沖洗2-5遍；(2)用0·1%Hgcl₂溶液振蕩浸泡5min，用無(wú)菌水沖洗3遍； (3)再用0·1%Hgcl2溶液靜置浸泡3min，用無(wú)菌水沖洗5~6遍。

2.外植體的誘導(dǎo)

在無(wú)菌條件下，瀝干消毒好的外植體，然后斜插于MS培養(yǎng)基中(注意不要將腋芽埋入培養(yǎng)基，置于28±2℃培養(yǎng)室中培養(yǎng),每天光照10 h左右,光照強(qiáng)度2 000Lx。培養(yǎng)15天后,剔除污染的材料，將獲得的無(wú)菌材料轉(zhuǎn)入誘導(dǎo)芽培養(yǎng)基上培養(yǎng)。芽的誘導(dǎo)培養(yǎng)基為MS+6 -BA0·3mg·L^-1+NAA0·1 mg·L-1+糖30g·L^-1+瓊脂7g·L^-1。其pH值為5·8。

3. 芽的繼代增殖培養(yǎng)

在組培工廠化育苗中，外植體不定芽的增殖率是一個(gè)主要經(jīng)濟(jì)指標(biāo)。最優(yōu)的芽增殖培養(yǎng)基，是提高芽增殖率的關(guān)鍵。因此,在誘導(dǎo)形成芽叢后，即可進(jìn)行芽的增殖培養(yǎng)基篩選試驗(yàn)。以確定各桉樹(shù)優(yōu)良無(wú)性系的最優(yōu)芽增殖培養(yǎng)，可采用正交試驗(yàn)設(shè)計(jì)作篩選芽增殖培養(yǎng)基的試驗(yàn)。

4. 生根培養(yǎng)

用添加了NAA的1/2MS培養(yǎng)基作為生根培養(yǎng)基。

5. 煉苗與移栽

將生根的試管苗移到遮蔭度為50%的自然條件下煉苗15~20天,取出試管苗，用自來(lái)水沖洗干凈基部的培養(yǎng)基,放入0·1~0·5 g·L^-1的高錳酸鉀溶液中浸泡1~3 min，再用自來(lái)水沖洗一遍，蓋上濕毛巾保濕以備移栽。在試管苗移栽至營(yíng)養(yǎng)袋前,先用3~5 g·L^-1的高錳酸鉀溶液消毒裝有基質(zhì)的營(yíng)養(yǎng)袋，再將清洗后的試管苗直接移栽到營(yíng)養(yǎng)袋中。移栽后及時(shí)淋透定根水，并蓋上塑料薄膜。一周后逐漸打開(kāi)塑料薄膜，同時(shí)注意溫濕度的控制。以此移栽成活率可達(dá)90%以上。當(dāng)營(yíng)養(yǎng)袋中的小苗長(zhǎng)至15 cm即可出圃上山造林或培植為采穗母株。

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